微分干涉显微镜与相差显微镜区别
微分干涉显微镜与相差显微镜在原理、适用样本、立体感呈现以及观察效果等方面存在显著差异。
一、原理差异
微分干涉显微镜:
利用平面偏振光作为光源,光线经过棱镜折射后分成两束,在不同时间经过样品的相邻部位。
这两束光随后经过另一棱镜汇合,样品中厚度上的微小差别会转化成明暗区别,增加了样品反差,造成了标本的人为三维立体感。
相差显微镜:
利用物体不同结构成分之间的折射率和厚度的差别,把通过物体不同部分的光程差转变为振幅(光强度)差。
通过将带有环状光阑的聚光镜和带有相位片的相差物镜结合,实现观测。
二、适用样本差异
微分干涉显微镜:
适用于观察较厚的样本,其折射率差别较大,因此影像的立体感更强。
特别适合于观察活细胞中较大的细胞器,如核、线粒体等。
相差显微镜:
主要用于观察活细胞或不染色的组织切片,有时也可用于观察缺少反差的染色样品。
样品厚度应较薄(通常不超过5μm),以避免相位移干扰及光的散射干扰。
三、立体感呈现
微分干涉显微镜:
能够显示结构的三维立体投影影像,立体感特别强,适合于显微操作。
相差显微镜:
虽然也能提高各种结构间的对比度,但立体感相对较弱。